Chaïr Hâna. 1995. Transformation génétique de protoplastes haploïdes de variétés méditerranéennes de riz (Oryza sativa L.). Montpellier : USTL, 100 p. Thèse d'université : Université des sciences et techniques du Languedoc
Autre titre : Genetic transformation of haploid protoplasts of mediterranean rice varieties (Oryza sativa L.)
Résumé : Dans le but de transférer aux variétés méditerranéennes de riz, les gènes de Bacillus thuringiensis codant pour les endotoxines à propriétés insecticides, notamment contre la pyrale du riz, il s'est avéré nécessaire de disposer d'une technique efficace de transformation génétique. Une technique de transfert direct de gènes utilisant le polyéthylène-glycol (PEG) a été adaptée aux protoplastes haploïdes des variétés Ariete et Miara. Elle a permis l'obtention de plantes transformées à des fréquences de 0.1 à 3.2 10 -6. Afin d'augmenter la fréquence d'intégration et d'expression des gènes transférés, différents facteurs ont été étudiés. Plusieurs systèmes de sélection des protoplastes transformés ont été comparés : le gène bar conférant une résistance au glufosinate d'ammonium permet d'obtenir les meilleures fréquences de transformation. L'activité de différents promoteurs des gènes à transférer, utilisés actuellement pour la transformation des céréales a été testée. La stratégie de cotransformation utilisant un rapport 2/1 entre le gène rapporteur et le gène marqueur a permis d'obtenir les efficacités de cotransformation les plus élevées, avec des fréquences de coexpression des 2 gènes de 60 %. Après analyse par cytométrie en flux des plantes transgéniques, il est apparu que le traitement au PEG des protoplastes induit une augmentation de leur niveau de ploïdie
Mots-clés Agrovoc : Oryza sativa, génie génétique, transformation génétique, Électroporation, protoplaste, haploïdie, marqueur génétique, résistance aux organismes nuisibles
Mots-clés géographiques Agrovoc : France
Classification Agris : F30 - Génétique et amélioration des plantes
Auteurs et affiliations
- Chaïr Hâna
Autres liens de la publication
Source : Cirad - Agritrop (https://agritrop.cirad.fr/312799/)
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