Análise de uma cisteíno-protease de 39 kDa identificada em bancos de cDNA do cacau

Do Amaral Santos Milena, Micheli Fabienne, Pirovani Carlos Priminho, De Mattos Cascardo Julio Cézar. 2009. Análise de uma cisteíno-protease de 39 kDa identificada em bancos de cDNA do cacau. In : XV Seminario de Iniciaçao Cientifica e X Semana de Pesquisa e Pos-Graduaçao, Ilheus, Brazil, 20-23 de octubre 2009. s.l. : s.n., Résumé, 1 p. Seminário de Iniciação Científica. 15, Ilhéus, Brésil, 20 Octobre 2009/23 Octobre 2009.

Résumé : As cisteíno-proteases são aquelas usam uma cisteína do sítio ativo como nucleófilo durante a catálise. Os genomas de plantas codificam cerca de 140 cisteíno-proteases. Estas enzimas podem estar envolvidas na ativação de outras enzimas, em defesa contra ataque de insetos, em morte celular programada, defesa contra patógeno e germinação de sementes. Além disso, elas apresentam importância biotecnológica em indústria de alimentos, têxtil, farmacêutica e de detergentes. Uma cisteíno-protease denominada TcCysPr04 foi identificada em bibliotecas de cDNA da interação entre Theobroma cacao e Moniliophthora perniciosa seqüenciadas na UESC. Esse trabalho objetivou novos homólogos da proteína CISPR04 identificadas em bibliotecas de cDNA coordenadas pelo CIRAD e publicadas recentemente. Os homólogos de TcCysPr04 apresentaram ORF´s com 1068 pb, conforme análise com o ORF Finder. A análise da sequencia de aminoácidos deduzida a partir da sequencia de nucleotídeos indica que: (i) a proteína possui massa molecular e ponto isoelétrico estimados de 39 kDa e 5.43, respectivamente, de acordo com programa pI/MW; (ii) possui um peptídeo sinal, com provável sítio de clivagem entre os aminácidos 19 e 20, revelados pelo programa SignalP 2.0; e (ii) possui um domínio inibitório entre os aminoácidos 56 e 112 e um domínio catalítico entre os aminoácidos 158 e 353, identificados mediante análise com os programas Pfam e ProDom. Primers foram engenheirados a partir de um mapa de restrição preparado com o WebCutter, visando a clonagem e expressão de três versões da proteína: (i) a proteína completa (eliminando o peptídeo sinal); (ii) somente o domínio inibitório; e (iii) somente o domínio catalítico. Na continuidade desse trabalho essas versões deverão ser expressas em bactéria e empregadas em estudos de caracterização bioquímica e funcional da proteína.

Classification Agris : F30 - Génétique et amélioration des plantes
F60 - Physiologie et biochimie végétale
H01 - Protection des végétaux - Considérations générales

Auteurs et affiliations

• Do Amaral Santos Milena
• Micheli Fabienne, CIRAD-BIOS-UMR DAP (BRA)
• Pirovani Carlos Priminho, UESC (BRA)
• De Mattos Cascardo Julio Cézar, UESC (BRA)

Source : Cirad - Agritrop (https://agritrop.cirad.fr/568358/)

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