Análise de acessos do gene CcDREB1D de Coffea canephora via transformação genética de Nicotiana tabacum

De Aquino Oliveira Sinara, De Araújo Carneiro Fernanda, Silva Rêgo Erica Cristina, Duarte Karoline Estefani, Costa Alves Gabriel, Carvalho Andrade Alan, Marraccini Pierre. 2015. Análise de acessos do gene CcDREB1D de Coffea canephora via transformação genética de Nicotiana tabacum. In : Anais do IX Simpósio de Pesquisa dos Cafés do Brasil. Consórcio Pesquisa Café. Curitiba : Consórcio Pesquisa Café, 5 p. Simpósio de Pesquisa dos Cafés do Brasil. 9, Curitiba, Brésil, 24 Juin 2015/26 Juin 2015.

Titre anglais : Analysis of CcDREB1D promoters of Coffea canephora through genetic transformation of Nicotiana tabacum

Résumé : Após sequenciamento, polimorfismos na região promotora do gene DREB1D (Dehydration Responsive Element Binding Protein) de Coffea canephora Conilon, indicaram a participação de três haplótipos (15, 16 e 17) no controle genético da tolerância à seca nos clones 14 (tolerante a seca) e 22 (sensível a seca), com as combinações de haplótipos 15-16 para o clone 14 e 15-17 para o clone 22. A fim de avaliar a capacidade desses fragmentos controlarem a expressão do gene repórter uidA, 3 construções gênicas, com os diferentes haplótipos do promotor do gene CcDREB1D, foram feitas no vetor binário pBI101 e testadas independentemente via transformação genética de Nicotiana tabacum. Testes histoquímicos em plantas transformadas de N. tabacum T1 indicaram uma forte atividade GUS correspondente ao controle positivo (pBI121) enquanto nenhuma atividade foi detectada para o controle negativo (WT). Os resultados mostraram que, mesmo fracos, os promotores pDREB1D de C. canephora são funcionais em tabaco (N. tabacum), se comportando de forma diferencial entre os haplótipos, sugerindo que os polimorfismos identificados neles são essências na regulação destas sequências.

Résumé (autre langue) : After sequencing, nucleic polymorphisms identified in the promoter region of the Coffea canephora Conilon DREB1D (Dehydration Responsive Element Binding Protein) gene, showed the participation of three haplotypes (15, 16 and 17) in the genetic control of drought tolerance for the clones 14 (drought tolerant) and 22 (drought susceptible), with the combinations 15-16 for the clone 14 and 15-17 for the clone 22. In order to evaluate the capacity of these fragments to control the expression of the uidA reporter gene, 3 genetic constructions, including different haplotypes of the CcDREB1D gene promoter region, were constructed into the pBI101 binary vector and tested independently by genetic transformation of Nicotiana tabacum. Histochemical assays in N. tabacum T1 showed a high GUS activity in the tissues of the positive control (pBI121) while no GUS activity was detected for those of the negative control (WT). The results showed that, even considered as weak, the C. canephora pDREB1D promoters are able to function in tobacco (N. tabacum), responding differentially between haplotypes, suggesting that the polymorphisms they contained are essential for the regulation of these sequences.

Classification Agris : F30 - Génétique et amélioration des plantes
F60 - Physiologie et biochimie végétale
H50 - Troubles divers des plantes

Auteurs et affiliations

• De Aquino Oliveira Sinara, CAPES [Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior] (BRA)
• De Araújo Carneiro Fernanda, CAPES [Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior] (BRA)
• Silva Rêgo Erica Cristina, UNESP (BRA)
• Duarte Karoline Estefani, EMBRAPA (BRA)
• Costa Alves Gabriel, CIRAD-BIOS-UMR AGAP (FRA)
• Carvalho Andrade Alan, EMBRAPA (BRA)
• Marraccini Pierre, CIRAD-BIOS-UMR AGAP (BRA) ORCID: 0000-0001-7637-6811

Source : Cirad-Agritrop (https://agritrop.cirad.fr/576584/)

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