Albina Emmanuel, Liu Haijin, Servan de Almeida Renata, Gil Patricia, Bataille Arnaud. 2018. Improved reverse genetics for single strand negative RNA viruses. Genève : OMPI, 49 p. N° de dépôt européen : 17305272.1, N° de brevet européen : EP20170305272, N° de dépôt international : PCT/EP2018/054903, N° de brevet international : WO2018/166793 A1
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Titre français : Génétique inverse améliorée pour virus à ARN simple brin négatif
Note générale : Date de dépôt européen : 2017-03-14 ; Date de dépôt international : 2018-02-28 ; Déposant : Cirad
Résumé : The invention relates to an in vitro method ofrescuing negative RNA virus from low virulent virus strain(s) or lentogenic- like virus strain(s) belonging to the order Mononegavirales including Bomaviridae, Filoviridae, Mymonaviridae, Nyamiviridae, Paramyxoviridae, Pneumoviridae, and Rhabdoviridae families, preferably belonging to the Paramyxoviridae family, comprising at least the steps of: (i) co-transfecting hast cells with a two-plasmid system comprising a. a pGenome plasmid comprising at least a sequence encoding a virus genome from low virulent virus strain(s) or lentogenic-like virus strain(s) and b. a pNPL helper plasmid comprising at least the sequences encoding the structural viral proteins nucleocapsid protein (N), phosphoprotein (P) and large protein (L), (ii) culturing hast cells under conditions for replication and transcription of the virus, and (iii) recovering the rescued negative strand RNA viroses.
Résumé (autre langue) : L'invention concerne un procédé in vitro de sauvetage d'un virus à ARN négatif d'une ou plusieurs souches virales de faible virulence ou d'une ou plusieurs souches virales de type lentogène appartenant à l'ordre Mononegavirales, comprenant les familles Bomaviridae, Filoviridae, Mymonaviridae, Nyamiviridae, Paramyxoviridae, Pneumoviridae, et Rhabdoviridae, de préférence appartenant à la famille Paramyxoviridae, comprenant au moins les étapes suivantes : (i) co-transfection de cellules hôtes avec un système à deux plasmides comprenant a. un plasmide pGenome comprenant au moins une séquence codant pour un génome viral d'une ou plusieurs souches virales de faible virulence ou d'une ou plusieurs souches virales de type lentogène et b. un plasmide auxiliaire pNPL comprenant au moins les séquences codant pour les protéines virales structurales protéine nucléocapsidique (N), phosphoprotéine (P) et grande protéine (L), (ii) culture des cellules hôtes dans des conditions de réplication et de transcription du virus, et (iii) récupération des virus à ARN à brin négatif sauvés.
Mots-clés libres : Reverse genetics, Strand negative RNA viruses, Newcastle disease virus
Classification Agris : L73 - Maladies des animaux
L10 - Génétique et amélioration des animaux
Champ stratégique Cirad : Axe 4 (2014-2018) - Santé des animaux et des plantes
Auteurs et affiliations
- Albina Emmanuel, CIRAD-BIOS-UMR ASTRE (GLP)
- Liu Haijin, CIRAD-BIOS-UMR ASTRE (FRA)
- Servan de Almeida Renata, CIRAD-BIOS-UMR ASTRE (FRA)
- Gil Patricia, CIRAD-BIOS-UMR ASTRE (FRA) ORCID: 0000-0001-7984-7340
- Bataille Arnaud, CIRAD-BIOS-UMR ASTRE (FRA) ORCID: 0000-0002-3508-2144
Source : Cirad-Agritrop (https://agritrop.cirad.fr/584578/)
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