Mbéguié-A-Mbéguié Didier, Fils-Lycaon Bernard, Chillet Marc, Hubert Olivier, Galas Colette, Gomez Rose-Marie. 2008. Extraction and purification of total RNA from banana tissues (small scale). Fruits, 63 (4) : 255-261.
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Version publiée
- Anglais
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Titre français : Extraction et purification de l'ARN total de tissus de banane (à petite échelle)
Résumé : Introduction. Le protocole vise à préparer de l'ARN total pour l'étude de l'expression de gènes par les techniques de Northern Blots, de Reverse Transcription PCR, et de PCR quantitative en temps réel ; pour l'isolement de cDNA par Reverse Transcription PCR ; pour la construction de bibliothèque de cDNA. Le principe, les principaux avantages, le matériel végétal requis, le temps nécessaire à l'obtention de l'ARN total et les résultats escomptés sont présentés. Matériel et méthodes. Cette partie décrit le matériel et les 27 étapes nécessaires pour préparer l'ARN à partir de tissus de peau et de pulpe de banane : préparation de la poudre de tissus végétaux, préparation du tampon d'extraction de l'ARN total, isolement de l'ARN à partir du tissu de banane broyé. Résultats. L'extraction de l'ARN total par la méthode décrite permet de réaliser son électrophorèse avec un gel à base de formaldéhyde comme dénaturant et sa transcription réverse in vitro. Un exemple d'application de Northern Blots est donné.
Mots-clés Agrovoc : banane, Musa, arn, purification, extraction, pulpe de fruits, tissu végétal, PCR
Classification Agris : F30 - Génétique et amélioration des plantes
Champ stratégique Cirad : Axe 1 (2005-2013) - Intensification écologique
Auteurs et affiliations
- Mbéguié-A-Mbéguié Didier, CIRAD-PERSYST-UMR QUALITROP (GLP) ORCID: 0000-0002-9256-3999
- Fils-Lycaon Bernard, INRA (GLP)
- Chillet Marc, CIRAD-PERSYST-UMR Qualisud (BRA)
- Hubert Olivier, CIRAD-PERSYST-UMR Qualisud (GLP)
- Galas Colette, INRA (GLP)
- Gomez Rose-Marie, INRA (GLP)
Source : Cirad - Agritrop (https://agritrop.cirad.fr/545747/)
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